石蠟切片把修好的蠟塊裝在旋轉切片機上，即可進行切片。切片必須保持切片刀銳利，切片厚度通常為5-7um，也可根據染色需要切成不同厚度，一般電腦冷凍石蠟切片機不超過10um。切好的蠟帶，放人40℃左右的溫水中將蠟片展平。良好的切片應無刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。切片如有上述問題，在進行免疫組織化學染色時會出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象。為能得到平整無皺褶的組織切片?？刹捎脙纱握蛊?，即先將組織切片漂浮在30％的乙醇溶液中進行次展片，然后將切片撈起，再次放人45-50℃的水浴中進行第二次展片，乙醇的濃度和水溫可視組織不同和石蠟熔點的高低自行調整。此過程是利用乙醇溶液與水之間的張力差展開切片的皺褶。為防止脫片，載玻片要涂黏片劑。對HE染色的切片，可在載玻片上涂抹薄層蛋白甘油，但蛋白甘油因含蛋白易導致非特異性免疫反應，故用于免疫組織化學染色的切片常用多聚賴氨酸、3—氨丙基—乙氧基甲硅烷等處理。

　　冰凍切片是酶組織化學和免疫組織化學染色中常用的一種切片方法，其突出的優(yōu)點是能夠較完好地保存細胞膜表面和細胞內多種酶活性以及抗原的免疫活性，尤其是細胞表面抗原更應采用冰凍切片。新鮮組織和已固定的組織均可作冰凍切片。為了得到的冰凍切片，選擇好的冰凍切片機和配套的切片機可以把新鮮組織切成20-400pm的厚片，以漂浮法在反應板內進行組織化學或免疫組織化學染色。因組織不冷凍，無冰晶形成也無組織抗原破壞，染色前又避免了組織脫水、透明、包埋等步驟對抗原的損害，故能較好地保留組織內脂溶性物質和細胞膜抗原。振動切片主要用于顯示神經系統(tǒng)抗原分布的研究。對于柔軟的胚胎腦組織，可用低熔點10％瓊脂糖包埋，振動切片機切成厚片，采用漂浮法在反應板內進行免疫熒光組織化學染色，激光掃描共聚焦顯微鏡觀察。

　　振動切片方法是利用刀片振動原理，用來將新鮮的活體組織或固定過的組織切成20um的薄片到1mm以上厚片的儀器。一般厚度度控制大約為1um，如果做熒光染色建議切成薄片。

　　幾中切片的比較：

　　振動切片方法簡單、快速，能使組織比較完整保留，適合做或組織電生理學等研究。與冰凍切片相比，不需要對組織冷凍，不會形成冰晶或造成組織抗原的破壞。與石蠟切片相比，不需要脫水、透明、浸蠟等過程，避免對抗原的損害。